NTA服务简介
外泌体的粒径分析是对外泌体样品进行表征的重要手段,相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。该数据结果展示有利于证明外泌体样品中粒子群体的大小分布符合经典外泌体的定义。 本公司采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗体标记的外泌体。
样本准备
1. 提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;
注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的最佳检测区间是10^7 particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5 particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;
我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2µl-100µl不等,取用量大于50µl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30µl。
3.生物样本应避免反复冻融,当天或次日可到可用冰袋,否则请用干冰,可混冰袋,干冰若挥发完可继续保持低温。
检测周期
实验室收到样本后3个工作日内完成检测,每个样本至少检测3次(单次送样量大于10个或有酌情延迟)。