免疫学反应检测

免疫学反应检测

淋巴细胞增殖抑制试验

间充质干细胞（P3）用丝裂霉素C处理后，按照1×106接种到24孔板中，37℃培养4小时使细胞贴壁。人外周血分离PBMC，用CFSE（终浓度为1µM）标记PBMC，接种PBMC到24孔板中，1×106/孔，每孔加10ug PHA，设置对照孔PBMC+PHA。培养4天后流式检测。CFSE为第一荧光(FL1), PE标记抗体为第二荧光(FL2)，用CellQuestPRO软件获取数据，Modfit软件分析。

特定淋巴细胞亚群检测

间充质干细胞（P3）用丝裂霉素C处理后，按照1×106接种到24孔板中，4小时后， 接种PBMC浓度1×106/孔，每孔加10ug PHA，设置阴性对照孔（PBMC）。培养四天后，收集悬浮细胞，流式检测Th1/Th2/Th17和Treg，Flowjo分析结果。



淋巴细胞分泌TNF-α抑制试验

间充质干细胞（P3）用丝裂霉素C处理后，按照1×106接种到24孔板中，4小时后，接种PBMC按照1×106/孔，每孔加10ug PHA，设置对照孔PBMC和PBMC+PHA组。培养四天后，收集上清，Elisa法检测TNF-α浓度。通过Elisa结果可以看出MSCs组分泌TNF-α浓度小于PBMC+PHA组，MSCs具有抑制PBMC分泌炎症因子TNF-α的能力。