细胞流式检测
流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。
间充质干细胞流式抗体鉴定流程
准备细胞
抗体染色
上机检测
间充质干细胞流式鉴定操作步骤
1、准备细胞：取培养的细胞离心（300 g/5min），弃去上清, 加入一定量PBS洗涤一次，弃去上清，弹散细胞，细胞重悬到5×106~10×106之间。
2、MSC人间充质干细胞流式鉴定配色方案：
取100 ml的细胞于EP管或流式管内，分三管染色。
第一管 阳性配色 Anti-human CD90 FITC, Anti human CD105 APC，Anti-human CD45 PE-Cy7各加5 ml。
第二管 阴性配色 Anti-human HLA-RA FITC, Anti-human CD34 PE-Cy7, Anti-human CD73 APC各加5 ml。
第三管同型对照 Mouse IgG1 K Isotype Control FITC 0.6 ml，Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 1.2 ml，Mouse IgG1 Isotype Control APC 1.2 ml。
配色依据：细胞治疗协会间充质和组织干细胞委员会2006年提出了MSC鉴定的zui低标准，关于细胞表型的要求是表达CD90， CD105和CD73不表达CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA-DR；阳性指标都需要染色，阴性指标一般选择2-3个指标，因为是做细胞表型鉴定，所以要配齐同型对照。
3、加入相应的抗体后混匀，建议弹管子，尽量不用枪头直接吹打，室温避光孵育15 min，染色过程中再混匀一次。
4、染色完成后加入1 ml的PBS洗涤细胞，离心300 g/5min。
5、弃去上清，弹散细胞，加入500 ml PBS重悬，上机检测。
注意：1、同型对照是根据染色抗体的用量来计算的，所以每种同型对照可能加入量可能不一样（具体可看后文同型对照章节的介绍）。
2、先上机检测同型对照管，各检测通道以这一管的信号设为阴性，在上机检测抗体染色管。
3、zui后结果的显示用峰图来表示，每种抗体的检测结果都与对应的同型对照染色结果叠加展示（ overlay ）。
MSC人间充质干细胞流式鉴定结果
