细胞冻存储存
一般我们培养出细胞后无论是实验还是临床细胞必然不可能一次性用完并且还需要保留样本，在保存细胞时就一定需要冻存。
1细胞悬液的制备
(1)按常规方法消化处于对数生长期的细胞培养物，制备单细胞悬液，并计算细胞总数；
(2)将细胞悬液以800～1000r/min 离心5min，去上清液；
(3)向细胞沉淀物中加入细胞冻存液，轻轻吹打混匀，使细胞密度达1×106～1×107个/ml ；
(4)按每管0.5-1ml 的量分装于冻存管内，拧紧管盖；
(5)在冻存管上做好标记，包括细胞名称、代次及冻存日期等内容。
2冻存
为保持细胞最大存活率，冻存时要遵循“慢冻快融”的原则。标准的降温速度是1-2℃/min ，当温度到达 -25℃，降温速度可加快至5-10℃/min，到-80℃可直接入液氮。
分级冷冻
(1)先将冻存管放入普通冰箱冷藏室（4～8℃），约30min；
(2)接着将冻存管置于普通冰箱冷冻室（-10℃～-20℃），约1-2 小时；
(3)然后将冻存管转移到超低温冰箱（-70℃～-80℃），过夜；
(4)最后将冻存管投入液氮中保存。
降温过程也可使用专为细胞冻存设计的程序冷冻仪，我们采用的是将冻存管放入冻存盒里，再放入-80℃过夜，由于聚氯乙烯导热比较慢，所以温度可慢慢降下来，次日可直接放入液氮罐。这样可以保证细胞的活力不受到温度变化速率的影响。