外泌体电镜鉴定
外泌体的电子显微镜鉴定是对外泌体样品进行表征的金标准,是文章投稿时不可缺少的重要数据。 通常电镜成像下的囊泡呈现出茶托状的结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),大小在30-150nm上下(依据不同的样品而有所差异)。
实验流程
1. 外泌体戊二醛固定。
2. 清洗:用1mL PBS清洗3次,每次静置15min。
3. e酸固定:加入0.5 mL 2%e酸溶液 4度固定2h。
4. 清洗:用1mL PBS清洗3次,每次静置15 min。
5. 脱水:用50%、70%、80%、90%乙醇各1mL梯度脱水分别静置15min,再用1mL 100%乙醇脱水2次,每次20min。
6. 置换:用1mL丙酮置换2次,每次静置15min。
7. 浸渍。
8. 包埋:将样品放入盛有纯包埋剂的包埋板中。
9. 聚合:将包埋板置于65℃条件下聚合48h。
10. 染色:醋酸双氧铀染色 10min后清洗;醋酸铅染色 10min后清洗。
11. 上机检测。
12. 提供实验报告。
三、服务说明及结果
1. 客户提供:外泌体(30 μl)或由我司分离得到外泌体。
2. 公司提供:基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期:10个工作日。