外泌体Western blot鉴定服务
一、技术简介
外泌体(Exosome)主要检测指标为CD63、CD9、CD81、Tsg101、Alix、HSP70等,针对外泌体的定性检测,至少选择2-3个指标就能满足文章发表就可以。大部分文献中没有检测内参,个别文章中使用了Actin、GAPDH和Tubulin作为内参进行检测,外泌体中的Actin、GAPDH和Tubulin的表达丰度相对于正常细胞样品中的较低,可能会检测不到任何条带或者条带微弱。
有CD9、CD81、CD63和HSP70抗体,专门用于WB检测。
二、实验流程
1. 外泌体BCA法定量。
2. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)。
3. 蛋白质转移到PVDF膜。
4. 膜的封闭和抗体孵育。
5. 结果检测。
6. 提供实验报告。